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公司动态
徕卡共聚焦显微镜图象模式
发布时间:2013-09-05        浏览次数:477        返回列表
徕卡共聚焦显微镜图象模式

(一)单张光学切片
光学切片是徕卡共聚焦显微镜的基本图像单位。从固定和染色的标本以单波长、双波长、三波长或多波长模式采焦数据以数字方式进行储存。使用LSCM采焦单幅光学切片的时间约为1S,图像所占的存储空间与采焦图像的大小分辨率有关,如采集一幅8bit的768×512像素的图像所占空间为0.3Mb。
 
(二)延时成像和活细胞成像
早期延时徕卡共聚焦成像采用高分辨率的LSCM研究活细胞,将定时器与照相连接起来,使用16mm电影胶片;目前则采用延时VCR、OMDR和数码成像系统记录,使用LSCM设定的时间间隔采焦一幅光学切片图像。
 
用LSCM进行活组织成像比对固定的组织成像更为困难,因为标本并不是总能耐受成像所需的苛刻条件,如不能一直保持标本存活,感兴趣或结构无法靠近物镜,或标本不适合镜台等。果蝇的翅成虫的深部发生,如将其解剖后则无法在培养的条件下成长,要研究这类组织基因表达,就需要在不同的发育阶段,从不同的幼虫中解剖、固定和染色成虫板。
 
活细胞成像要求在成像过程中始终保持镜台上细胞的存活,应注意使用强度的激光,因为激光束造成的光损伤在多次扫描时可以累加起来。抗氧剂加入培养液可减少来自激发的荧光分子产生的氧,因为氧可引起自由基形成并杀死细胞。
 
备注:徕卡共聚焦显微镜图象模式的部分文章由北京悦昌行科技有限公司编辑整理上传。