徕卡生物显微镜的发展
徕卡激光扫描共聚焦显微镜是80年代发展起来的—项具有划时代意义的高科技新产品．是当今世界上的分子细胞生物学分析仪器。它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置．利用计算机进行图像处理，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在此细胞水平k观察诸如ca2、pN值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化，成为形您学、分广细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究丁具。伞然激光妇描共聚焦显微镜在材料科学、地质科学等工业工程力“面也有着广泛应淌。
我们知道，传统的徕卡显微镜使用，标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射光或散射光的干扰；徕卡激光扫描共聚集显微镜利用激光扫描束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面上的每一点扫描(图11)．标本的被照射点，由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电感藕合器件逐点或逐线接收，迅速在汁贸机监视器屏幕上形成英光因伤。照明针孔与探测针物镜焦平面是共须的，年个向k的点同时聚焦发射刨孔，焦平面以外的扫不会合探测针，这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面，先服了普通显微镜图像模糊的缺点。
另外在徕卡生物显微镜的载物台加几个微量步进马达．可使载物台上下步进移动，步进距离为o．1Pm，则细胞或组织各个横断而的图像都能清楚地显示。
当然，徕卡激光妇描共聚焦显微镜是经过几十年的不断改进，才逐渐发展起来。马文•问斯基(MurvmMlnsky)在他的美国卜阐明了徕卡扫描共聚焦显微镜技术的某些基太原理。由严当时没有合适的光源，问斯基的仪器严土的图像质丛不算太好，因此没有引起人们对共聚焦显微镜的兴趣。1年以后，即1967年，埃格尔(即xcr)和佩括号〔Patran，次成功地用共聚您显微镜产少了一•个光学横断面，他们所用的共聚焦显微镜的核心是尼普科夫盘(州pkondls队)，此盘依f：光源和针孔之后．并风从盘射出的光束以连续的光点在盘旋转时照到物体上。出于尼普科大盘在设计中同样受到技术个完善的T1扰，因此也没有获得太大成功。
1970年，牛津和阿姆斯特丹同时向科学界推荐一种新型的扫描共聚焦显微镜。1977年作为午津集团成员的c．J．R．谢帕德(C．J．R．ShepparJ)和T•咸尔逊(T．w?1sfm)将亡述新型的徕卡共聚焦显微镜勺构成共聚焦成像的几何学的基础理论结合起来，描述／光与被照明物体的原Zt之间的非线件关系和徕卡激光扫描器的枪曼光谱学。l978年、阿姆斯持丹大学的G．J•布羊肯夫(〔；1．HfankenhoH)发明厂’种有看较高数。
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