徕卡生物显微镜显微照相对物镜、目镜及聚光镜的选择
一、物镜的选择
消色差物镜不适用于徕卡生物显微镜显微照相,它体身会引视场图象的边缘焦点不实,而呈现模糊的现象。平场物镜就可获得视场得视场清晰而平坦的图象,所以在显微照相时,必须选用平场消色差物镜和平场复消色差物镜。不仅如此,显微照片的结微结构和层次的优劣,也取决于物镜的分辨率。
在进行高倍干燥系物镜的徕卡生物显微镜显微照相时,采用带校正环物镜,因高倍干燥系物镜的成象质量与盖玻片的标准厚度有关,盖玻片的厚度不符合标准,将造成覆盖差而影响显微照相的质量。在暗场、透射式荧光及油浸显微照相时,应选用带虹彩光阑的物镜,借调节光阑的大小,达到的图象对比度。有些被检物体不能应用盖玻片,应选用无罩物镜。另外在进行油浸荧光显微照相时,应使用无荧光油
二、目镜的选择
观察目镜是不能用作徕卡生物显微镜显微照相,必须使用照相目镜,它的作用是为物镜的象差作光学补偿,使投射到感光片上的图象四周与中心都尽可能在一焦点平面上。因此,应用原配置的照相目镜。
三、聚光镜的选择与孔径光阑的应用
聚光镜在徕卡生物显微镜显微照相术上的作用很大,它不仅是将光源投射来的光有效地聚焦到被检物体上,更重要的是产生与物镜相适应的光束使图象的反差和焦深处在状太。这些条件的获得,是以调节聚光镜的孔径光阑从而使聚光镜的数值孔径与所用物镜数值孔径达到对应关系。前己述及,在观察时聚光镜的数值孔径应于物镜一致或稍大一些;而在显微照相时,大多数的被检物体,如想得到高质量的照片,孔径光阑要调节在物镜数值孔径的60~80%之间,也即是缩去40~20%,至于缩去多少,要根据图象的反差而定。大了整个照片反差降低;小了图象的分辨率将受到影响。缩小的计算方法甚为简便。
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