徕卡偏光显微镜镜检术的方式以及要求
方式:
(一)正象镜检:在徕卡偏光显微镜中又称无畸变镜检,其特点是使用低倍物镜,不用伯特兰透镜,同时为使照明数值孔径变小,推开聚光镜的上透镜。
生物体的双折射性通常比结晶体微弱,因而较难判断,在正象镜检下,可利用石膏补偿片或云母补偿片来进行镜检。使用石膏补偿补偿片,在正交检偏位下视场呈紫红色,当旋转载物台时,具各向同性的部分仍为紫红色;而具双折射性的部分则呈现青色和黄色。尽管双折射性很微弱,也容易加以鉴别。利用云母补偿片,干涉色呈灰色,但与双折射体重合时,则变黑暗或黄色。
(二)锥光镜检:在徕卡偏光显微镜中又称干涉象镜检,这一镜检方式是旋入聚光镜的上透镜,使偏光亮度集中,取正交检偏位,用高倍物镜调焦至观察到被检物体,此时可取下目镜并拉出伯氏透镜,往镜筒内看,可见位于物镜上方的小圆形象,即干涉象。将目镜放回并推入伯氏透镜,则将此象再次放大。如果图象以黑十字串通的同心圆,此物为单轴体;若干涉轮有两个中心,稍加旋转,围绕中心的圆轮交替变位,则为双轴体。
生物体的组织虽不是晶体,但也具单、双轴体,不过生物组织多为单轴体性质,而植物的细胞壁则为双轴体性质。
要求:
(一)在徕卡偏光显微镜中光轴与载物台通光孔的中心必须在一直线上,否则旋转载物台时,被检物体就偏离视场中心,甚至移到视场之外,而影响镜检。
(二)在徕卡偏光显微镜中起偏镜和检偏镜均标有振动方向的符号,当处于正交状态时,习惯上通常使起偏镜的振动方向与目镜内十字线的横线一致;而检偏镜的振动方向与十字线的纵线一致。
(三)在徕卡偏光显微镜中制片不宜过薄,否则微弱的双折射性就易消失。同时应先以新鲜状态进行观察不然常由于固定,染色等步骤的处理,而使双折射性加强或消失,然后再对照进行观察。
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